Порівняльна характеристика стовбурових клітин та ефективність їх застосування за експериментального цукрового діабету у тварин

Скорочена інформація про документ
dc.contributor.authorКовпак, Віталій Васильович
dc.date.accessioned2019-11-12T12:32:51Z
dc.date.issued2019
dc.descriptionThe thesis for awarding a scientific degree of doctor of veterinary sciences in specialty 16.00.02 «Pathology, Oncology and Morphology of Animals». National University of Life and Environmental Sciences of Ukraine. Kyiv. 2019. The thesis deals with the current issues in veterinary medicine, in particular the experimental solution of the scientific issue of the influence of bone marrow stem cells, pancreas stem cells and adipose tissue stem cells, upon the development of alloxan diabetes in rats and cats. There have been presented immunophenotypic and genetic characteristics of the abovementioned stem cells in culture in the course of their cultivation, depending on species. There have been presented the optimized technologies for the isolation of stem cells from adipose tissue and pancreas of cats and rats. There have been optimized the conditions for their cultivation and storage. The abovementioned cultures have been heterogeneous characterized and assessed in terms of morphology and functioning in vitro. According to the results of the study, it has been found that the adipose tissue disaggregation using 2 mg/ml collagenase (type II) and 4 % bovine serum albumin for a rat, and 1 mg/cm3 collagenase (type II), 5 mg/cm3 hyaluronidase and 4 % bovine serum albumin for a cat, is the best practice for obtaining the stem cells culture. A cryogenic environment containing 90 % fetal bovine serum and 10 % dimethylsulfoxide – making it possible to keep cells viability within 86.3 % – is the best way to preserve the stem cells culture of the bone marrow of a rat using a slow freezing method. A cryogenic environment containing 95 % fetal bovine serum and 5 % dimethylsulfoxide is the best for preservation of the bone marrow stem cells of a cat, as supported by the data obtained after defrosting: cells viability was 65 %. In the course of determination of the best medium for the cultivation of cultures of the bone marrow stem cells, it has been found that the use of Eagle's medium, modified Dulbecco F12 (D8437) with the addition of 20 % fetal bovine serum and an antibiotic-antimycotyс in the amount of 10 μl/cm3 medium provides the highest proliferation index of cells of a rat. It turned that Eagle's medium, modified Dulbecco (D5648) with the addition of 20 % fetal bovine serum and an antibiotic-antimycotic 10 μl/cm3 was the best for the cultivation of the bone marrow stem cells of a cat. Also – using a method of immunocytochemical detection of membrane proteins peculiar for the cells with a low differentiation degree – there has been studied the stem cell cultures phenotype derived from different sources. There has been discovered that the culture of bone marrow cells contains cells expressing markers peculiar for hemopoietic (CD34, CD45, CD48), epithelial (CD66e, CD326, pancreatin) and mesenchymal stem (CD56 and CD66e) cells. The culture of adipose tissue cells consists of cells expressing markers peculiar for hemopoietic (CD34, CD45, CD48), epithelial (CD66e, CD326, pankeratin), mesenchymal stem cells (CD56 and CD66e), and рreadipocytes (CD54). The expression of markers peculiar for hematopoietic cells decreases with passages, meaning lower percentage of these cells in the culture. In the adipose cells culture of a cat, starting from the passage III, the expression of markers peculiar for targeted adipogenic differentiation of cells tends to increase. The study has found out that the pancreas cells culture expresses the smallest spectrum of the CD-markers being studied. The markers of the pancreas cells culture are negative that are peculiar for hematopoietic cells, however the expression of markers peculiar for epithelial cells is well-defined. In the course of the study there has been evaluated the karyotype stability of culture cells derived from different sources during the in vitro cultivation under the cytogenetic control. It has been discovered that the cells cultivated in vitro tend to have genetic errors occurring in the form of aneuploidy and polyploidy. There has been tracked the correlation between the peaks of the number of aneuploid cells and the CD95 expression. In the course of cultivation, the variability of karyotype of the stem cells derived from the bone marrow, adipose tissue and pancreas of rats and cats, does not go beyond the spontaneous level of mammals. The results of the study have showed that introduction of the culture of stem cells of the pancreas, adipose tissue and bone marrow against the background of alloxan diabetes significantly decreases the glucose levels in the blood of recipient animals. In the case of transplantation of the pancreas stem cells culture, there has been observed an increase of islets of Langerhans, mainly due to neogenesis of islets. Also there has been observed the improved regeneration of cells in previously formed islet tissue. The introduction of the culture of bone marrow stem cells significantly increases the total amount of islets of Langerhans thanks to regeneration, by boosting the islet cells proliferative activity. Transplantation of the cultures of adipose tissue stem cells tends to stimulate neonogenesis of islets of Langerhans in the pancreas. The adipose tissue stem cells showed the lowest effectiveness in the course of the studyuk_UA
dc.description.abstractДисертація на здобуття наукового ступеня доктора ветеринарних наук зі спеціальності 16.00.02 «Патологія, онкологія і морфологія тварин». Національний університет біоресурсів і природокористування України. Київ. 2019. У дисертації висвітлено актуальне у ветеринарній медицині питання – експериментальне вирішення наукової проблеми впливу стовбурових клітин, отриманих з кісткового мозку, підшлункової залози та жирової тканини, на перебіг експериментально сформованого алоксанового цукрового діабету у щурів та котів. Представлено імунофенотипову та генетичну характеристики вищезазначених стовбурових клітин у процесі їх культивування залежно від видової належності. Запропоновано оптимізовані технології виділення стовбурових клітин із жирової тканини та підшлункової залози котів і щурів, оптимізовані умови їх культивування та зберігання. Здійснено морфологічну та функціональну оцінки вищезазначених культур в умовах in vitrо та наведено їх характеристику. За результатами проведених досліджень встановлено, що введення культур стовбурових клітин підшлункової залози, жирової тканини та кісткового мозку за експериментально сформованого цукрового діабету достовірно сприяє зниженню рівня глюкози у крові тварин-реципієнтів. За трансплантації культури стовбурових клітин підшлункової залози відмічали збільшення загального об’єму острівців Лангерганса, насамперед, завдяки неогенезу острівців, а також спостерігали прискорення регенерації клітин у раніше сформованій острівковій тканині. Введення культури стовбурових клітин кісткового мозку призводить до збільшення загального об’єму острівців Лангерганса більшою мірою через регенерацію шляхом посилення проліферативної активності клітин острівців. Трансплантація стовбурових клітин культури жирової тканини стимулювала неогенез острівців Лангерганса у підшлунковій залозі. Ефективність стовбурових клітин жирової тканини була найнижчою, порівнюючи з культурами червоного кісткового мозку та підшлункової залозиuk_UA
dc.identifier.citationПорівняльна характеристика стовбурових клітин та ефективність їх застосування за експериментального цукрового діабету у тварин: автор. дис. ... доктора ветеринарних наук: 16.00.02 "Патологія, онкологія і морфологія тварин" (ветеринарніі науки) / В.В. Ковпак ; Національний університет біоресурсів і природокористування України. - К., 2019. - 42 с.uk_UA
dc.identifier.urihttps://dglib.nubip.edu.ua/handle/123456789/987
dc.language.isoukuk_UA
dc.publisherНУБіП України
dc.subjectстовбурові клітиниuk_UA
dc.subjectпідшлункова залозаuk_UA
dc.subjectцукровий діабетuk_UA
dc.subjectкотиuk_UA
dc.subjectщуріuk_UA
dc.subjectstem cells
dc.subjectpancreas
dc.subjectdiabetes mellitus
dc.subjectcats
dc.subjectrats
dc.titleПорівняльна характеристика стовбурових клітин та ефективність їх застосування за експериментального цукрового діабету у тваринuk_UA
dc.typeThesisAbstractuk_UA

Файли

Контейнер файлів

Зараз показуємо 1 - 1 з 1
Ескіз
Назва:
kovpak_V.V.pdf
Розмір:
1.41 MB
Формат:
Adobe Portable Document Format
Завантажити

Ліцензійна угода

Зараз показуємо 1 - 1 з 1
Ескіз
Назва:
license.txt
Розмір:
1.71 KB
Формат:
Item-specific license agreed to upon submission
Опис:
Завантажити

Колекції

Автореферати дисертацій та дисертації